dna的粗提取和鉴定 高考大纲新加必备知识点：DNA的粗提取与鉴定

粗DNA提取与鉴定实验是高考大纲中的考点之一，但在三中必修、选修课中没有出现，容易被忽视。列出考试重点，快速学习。

提取生物大分子的基本思路是选择一定的物理或化学方法来分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提，需要利用DNA与RNA、蛋白质、脂质之间的物理化学性质差异来提取DNA，去除其他成分。

1.脱氧核糖核酸的溶解度

DNA、蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。利用这一特性，选择合适的盐浓度，可以充分溶解DNA，沉淀杂质，反之亦然，从而达到分离的目的。

2.脱氧核糖核酸对酶、高温和洗涤剂的耐受性

蛋白酶可以水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质经不起60-80℃的高温，而DNA只有在80℃以上才会变性。洗洁精可以崩解细胞膜，但对DNA没有影响。

3.DNA的鉴定

沸水浴中，DNA接触二苯胺会被染成蓝色。

4.实验材料的选择

所有含有DNA的生物材料都可以考虑，但使用DNA含量相对较高的生物组织更容易成功。

5.将细胞粉碎，得到含有脱氧核糖核酸的滤液

在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌，过滤，收集滤液。如果实验材料是植物细胞，加入一定的洗涤剂和盐，充分搅拌研磨，过滤后收集研磨液。

6.滤液中的杂质被除去

方案一的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案3的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。

特别提醒:

(1)为什么反复溶解沉淀DNA，可以去除杂质？

用高盐浓度溶液溶解DNA，可以去除高盐中不能溶解的杂质；溶解在低盐溶液中的杂质可以通过沉淀低盐浓度的DNA来去除。因此，通过反复溶解和沉淀DNA，可以除去不同于DNA溶解度的各种杂质。

(2)方案二和方案三有什么区别？

第二种方案是用蛋白酶分解杂质蛋白，从而将提取的DNA从蛋白中分离出来；方案三利用DNA和蛋白质耐高温的差异，使蛋白质变性，从DNA中分离出来。

7.脱氧核糖核酸沉淀和鉴定

过滤处理后的溶液，加入与滤液相同体积的冷却酒精溶液，并在两个试管中各加入4毫升二苯胺试剂。混合均匀后，将试管放入沸水中加热5min。试管冷却后，比较两个试管溶液的颜色变化，看溶解有DNA的溶液是否变蓝。

8.以血液为实验材料时，

每100毫升血液中应加入3g柠檬酸钠，以防止血液凝固。

9.二苯胺试剂

现在就要用，不然影响鉴定效果。

10.脱氧核糖核酸溶解度与氯化钠溶液浓度的关系:

当氯化钠溶液的浓度低于0.14摩尔/升时，DNA的溶解度随着浓度的增加而降低。当氯化钠溶液的浓度高于0.14摩尔/升时，DNA的溶解度随着浓度的增加而增加。2ml/ln ACl和0.015ml/ln ACl作为溶出试剂。

11.鸡血细胞液体容器

首选塑料容器。

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