二代测序技术简介

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二代测序技术简介

发布时间:2020-07-25 10:53:32

高通量测序技术(High-throughput Sequencing)是一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,又称下一代测序技术(Next-Generation Sequencing)、二代测序技术,其使得可对一个物种的基因组和转录组进行深入、细致、全貌的分析,所以又被称为深度测序(Deep Sequencing)。

第二代测序技术的核心思想是边合成边测序(Sequencing By Synthesis),即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列,现在广泛应用的二代测序仪供应商主要为Illumina和Life Tech(Thermo Scientific)。

Illumina

美国Illumina公司自2006年进军基因测序市场以来,陆续发布了HiSeq、MiSeq、NextSeq等一系列测序仪器。

(Illumina公司的各型号测序仪)

测序方法采用边合成边测序的方法,基于专有的可逆终止化学反应原理。测序时将基因组DNA的随机片段附着到光学透明的玻璃表面(即Flow cell),这些DNA片段经过延伸和桥式扩增后,在Flow cell上形成了数以亿计Cluster,每个Cluster是具有数千份相同模板的单分子簇。然后利用带荧光基团的四种特殊脱氧核糖核苷酸,通过可逆性终止的SBS(边合成边测序)技术对待测的模板DNA进行测序。

(Illumina测序原理)

Life Tech(Thermo Scientific)

美国Life Tech公司,现被Thermo Scientific(赛默飞)收购。在2010年底推出了首款半导体测序仪Ion PGMTM,可配合使用不同的芯片,满足不同的通量需求,随后又推出了Ion Proton平台。

(Life Tech测序仪)

测序基于半导体测序原理。在半导体芯片上布满小孔,每一个小孔就是一个测序反应池,当一个被单克隆序列覆盖的磁珠进入小孔后,开始测序反应:按照顺序依次流经四种碱基,当发生碱基插入时,便有H离子的释放,从而引起小池内的PH的变化,PH的变化被反应池下面的感应器所感应,依次引起电势和电压的变化,然后最终被转换为碱基信息。

• 测序原理简单-直接检测氢离子,无需荧光检测

(Life Tech测序原理)

• Life-tech ion torrent 目前测序速度最快的高通量测序仪

(一天之内完成从样本制备到测序数据产生全部流程)

• Ion Proton与HiSeq2000技术指标对比

明志医学检验实验室

明志医学检验实验室是专门从事基因检测的独立第三方医学检验机构,拥有十万级的洁净检测间,配有国际先进Ion Proton测序仪,推出的实体瘤靶向用药基因检测,全面涵盖目前现有靶向药物、化疗药物、临床试验药物,为临床的精准靶向药物匹配、分子分型、耐药监测、预后评估、疗效及复发监控等提供全面准确的参考信息,为肺癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、胃肠间质瘤、食管癌、胃肠道肿瘤、黑色素瘤等实体瘤患者提供最佳的个体化诊断和治疗解决方案。

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